
齧齒(chǐ)類(lèi)動物血常規結果分析注意事(shì)項
血液學檢查是動物(wù)疾病狀態評估、術前檢查和(hé)常規體檢中必不可少的內(nèi)容。評估血常規檢測報告的可靠性(xìng)並(bìng)解讀其結果是獸醫朋友們的工作(zuò)日常(cháng)。本文就血液學(xué)檢查的一些要點進(jìn)行分析探討。
采血(xuè)是進行血(xuè)常規檢查的第一步(bù),本公眾號曾經發表《獸醫(yī)隨(suí)筆:實驗動物采血指(zhǐ)南》一文,介紹采血(xuè)量和采血點的(de)一般指導意見。
進行血液學分析時通常建議用EDTA抗凝管采集樣本,但采集時(shí)應該注意抗凝劑和血(xuè)液的比例。樣本質量會顯著影響檢測結果,常見的樣本質量問題有:
抗凝效果(guǒ)不佳導(dǎo)致出現血凝塊,會使血小板(PLT),白細胞(WBC),紅細胞(RBC),紅(hóng)細胞壓積(HCT)假(jiǎ)性降低;
溶血會使RBC、HCT假性降低的同時平均紅細胞血紅(hóng)蛋白濃度(MCHC)、平(píng)均紅細胞血紅(hóng)蛋白(MCH)假性(xìng)升高(gāo);
乳糜血會(huì)使血紅蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性升高;
樣本不(bú)新(xīn)鮮會使紅細胞形態發生改變導致MCV和(hé)HCT假性升高,MCHC假性降低,同時(shí)白細胞形(xíng)態也(yě)會(huì)發生改變。
紅細胞、白細胞和血小板是血常規報告中需要(yào)解讀(dú)的三個方麵。
紅細(xì)胞
相比於人及其他哺乳類動物,齧齒類動物的紅細(xì)胞自有其特征。倉鼠的(de)RBC約6.0微米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生(shēng)時紅細胞較大(10.03 μm),但在出生後30天內變到小於6μm。小鼠(shǔ)RBC大小約4-7μm,隨年齡增長(zhǎng)而增加。多色性是齧齒類動物血象的(de)一個常見特征。在(zài)豚鼠血塗片上還可見紅細胞疊連。特定疾病模型小鼠中,如β地中海貧血模型小鼠RBC可觀察到異常形態,例(lì)如(rú)靶形紅細胞、棘形狀紅細(xì)胞、淚滴狀紅細胞、破碎狀紅細胞、有核紅細胞等。
(圖片(piàn)來源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數哺乳動物(包括人)不同(tóng)的是,新生齧齒類動物(小鼠、大鼠、豚鼠、沙鼠)的血紅蛋白和血(xuè)細胞比容值低於成年動物;新出生大鼠有16%的網織紅細胞,成年後則減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠的RBC計數(shù)存在性別(bié)差異(yì),雌性的計數通常比雄性高。不同品係的小鼠和大鼠,血紅蛋白值也(yě)會有很大的差異。
樣本采集部位或麻醉的(de)影響(xiǎng)會導致血常規數(shù)據的變化。例(lì)如,從大鼠(shǔ)尾部采(cǎi)集的樣本中的血紅蛋白和紅細胞比容比從腹主動脈或心髒中采集(jí)的樣本中要高。豚鼠中已經證實RBC值可能由於麻醉期間(jiān)發生脾內紅細胞扣留而降低。
影響RBC參數的非致病性條件還包括妊娠、季(jì)節(jiē)變化等。在大鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減少。在倉鼠中,RBC計數、血(xuè)紅蛋白濃度和紅細胞比容在(zài)冬眠期間升高,這是因為在冬眠期間,倉(cāng)鼠基礎代謝(xiè)率降低,RBC壽(shòu)命延長了。
紅細胞(bāo)和貧血
紅細胞指標重點關注RBC、HCT和Hb,它們(men)的變化可以(yǐ)提示(shì)動物貧血或紅(hóng)細胞增多。
齧齒類動物中並沒(méi)有原發性的紅細胞增多症,但可(kě)能見於輕度脫水的(de)動物(wù)。貧血則較為常見。初步(bù)判斷為貧血後,還需要關注平均紅細胞體積(MCV),MCH和MCHC,可用於輔助判(pàn)斷貧血類型,這三項都偏低常見於缺鐵性貧血,而高於(yú)正常(cháng)範圍多(duō)見於葉酸(suān)或維生素B12缺(quē)乏引起的貧血。網織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞,是反映骨髓造血功能的重要指標。當其升高時,提示骨髓造血功能旺盛(shèng),可能有溶血性貧血、缺鐵性貧(pín)血等;而當其降低時,可能有再生(shēng)障礙性貧血、急性白血病等。
儀器分析的(de)血常規化驗單隻能給出(chū)各種細胞的數量,但並不能(néng)給出細胞形(xíng)態的異常描述。因此為了更準確分析(xī)血液學檢查結果還建議對血樣塗片(piàn)進行形態學檢查。
RBC形態學可區(qū)分貧血的原因(yīn):出血、溶血、缺鐵、非再生性貧血、骨髓疾病(bìng)或淋巴細胞增生性疾病(白血病)等。
如果(guǒ)診斷為溶(róng)血(xuè)性貧血,則需(xū)要在血塗片(piàn)中尋找血液(yè)寄生蟲的證據,如球狀附紅細胞(bāo)體和鼠血巴爾通體可能導致小鼠或大鼠貧血。如果出現小紅(hóng)細胞增多症、血色素減少、總蛋白低、血小板增多和網織紅細胞計數升高則提示有慢性失血,建議檢查體表寄生蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠和大鼠中可見這種現象。
白細胞
白細胞是(shì)機體(tǐ)抵禦感染、調控(kòng)炎症、免疫和造血的關鍵。
齧齒類動物的白(bái)細胞形態和其他哺乳動物(wù)相似,但又有一定區別(bié),齧齒類動物(wù)的粒細胞被稱(chēng)為嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色顆粒,與嗜酸性粒細胞相似。豚鼠有獨特(tè)的Foa-Kurloff細胞(bāo)(一種T淋巴細胞),含有一個大的細(xì)胞(bāo)質包涵體。齧齒類(lèi)動物的白細(xì)胞類型與其他哺乳動物相(xiàng)似(sì),但淋巴細胞數量遠超過粒細胞(bāo):淋巴細胞約占86%,中(zhōng)性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜(shì)酸性(xìng)粒細(xì)胞約占1% ~ 4%,嗜堿性粒細胞很少。
WBC計數每天都會(huì)發生波動,因此采集樣本的位置和時間不同,結(jié)果也可能不同。中(zhōng)性粒細胞計數隨著大鼠年齡的增長而增加,淋(lín)巴細胞計數隨著年齡的增長而減少。
豚鼠的Kurloff 細胞
(圖片來源:https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞(bāo):淋巴細胞
淋巴細胞增多
淋巴細胞分為T淋巴細胞和B淋巴(bā)細胞,大(dà)多在外周淋巴組織中生成並(bìng)在血液和(hé)淋巴組織中循環。淋巴細胞的(de)增多大多為生理性的。反應(yīng)性淋巴(bā)細胞增多的原因包括注射疫苗後的短暫反應、長期免疫刺激(jī)、甲狀腺功能亢進等;腎上腺皮質功能減退(tuì)也會導(dǎo)致(zhì)淋巴細(xì)胞增多,並(bìng)常伴隨低血糖、電解質異常,出(chū)現高鉀低鈉和高鈣血(xuè)症(zhèng);淋巴瘤、胸腺瘤可(kě)見淋巴細胞異常升高,淋巴細胞性白血病(bìng)則在淋巴(bā)細胞異常升高(gāo)的同時伴有其(qí)他細胞係的減(jiǎn)少。
淋巴細胞減少
淋巴細胞減少最常見的原因是內外源性皮質類固醇(chún)激素增多,導(dǎo)致(zhì)其從血液循環中轉移(yí)到淋巴組織中(zhōng)。在急性(xìng)炎症反(fǎn)應、病毒感染以及發生內毒素血症和敗血症時,也可見淋巴細胞減少。免疫缺陷病毒感染、免疫抑製(zhì)藥物的使用也會讓(ràng)淋巴細胞生成減少。淋巴回流受阻或丟失也會讓其(qí)計數減少。
(A)淋巴細胞,特征是有深紫色圓形核;(B)單核細胞,特征是有腎形細胞核;(C)中性粒細胞,特征為有紫色多小葉細胞核。
(圖片來源:Bjorner & Zhu, 2019)
白細胞:中性粒(lì)細胞
中性粒細胞(bāo)增多(duō)
與其他哺乳動物一樣,急性炎症反應的特征是中性粒細胞增多並有核左移。但並不是出現中性粒細胞(bāo)增多就意味著急性炎症反(fǎn)應,動物經曆劇烈運動、驚嚇傷心等強(qiáng)烈情(qíng)緒後也可出現生理性中性粒(lì)細胞增多,但不會出現核左(zuǒ)移。
應激或皮質類固(gù)醇也可導致動物出現中(zhōng)性粒細胞數量增加,無左移。
此外慢性(xìng)粒細胞性白血病、中性粒(lì)細胞功能障礙(ài)也可使中(zhōng)性粒細胞(bāo)數量增加,同時出現核左移、多組織髓外生成粒細胞、血小板減少等異常。
正常情況(kuàng)下,外周血液中性粒細胞以分葉核為主,胞核常分為(wéi)2~5葉,杆狀核較少。中性杆狀核粒細胞增多或(和)出現(xiàn)晚幼粒細胞、中幼粒細胞,甚至原始/早幼粒細胞的現象,稱為核左移。
中性(xìng)粒(lì)細胞減(jiǎn)少
中性粒細胞減少也非常(cháng)常見,其中臨床常見的因素為嚴(yán)重的細菌感染,例如肺炎、敗血症、腹膜炎(yán)等,常會伴隨核左移和中毒性變化。骨髓疾病、藥物毒性、病毒感染(rǎn)和腫瘤(liú)等也可造成中性(xìng)粒細胞減少,同時可能會伴有紅細胞和血小板的減少。
白細胞:嗜酸性粒(lì)細胞(bāo)
嗜酸性粒細胞主(zhǔ)要聚集在皮膚、消化道和呼吸道黏膜等疏鬆結締組織中(zhōng),它的增多常見於寄生(shēng)蟲感染的動物(wù)和發生I型超敏反應的(de)動物。也由於其分布特點,大(dà)多血(xuè)液寄生蟲不會引起嗜酸性粒細胞增(zēng)多。此外(wài),還有一些臨床原(yuán)因可導(dǎo)致嗜酸性粒細胞增多,比如(rú)嗜酸性(xìng)粒細胞性腸炎、嗜酸性肌炎等炎症反應;某些能促進嗜酸性粒細胞生成和釋放的(de)腫瘤(淋巴(bā)瘤、鱗狀細胞癌等);腎上腺(xiàn)皮質機能減退等。
白細胞(bāo):嗜堿性粒細胞
嗜堿性粒細胞參與遲發性過敏和寄生蟲免疫反應,因此(cǐ)嗜堿性粒細胞增多症常和嗜酸性粒(lì)細胞增多症同時發生。此外還可見於高脂血症、嗜堿性粒細胞性白血病(bìng)和骨髓增生性疾病。
白細(xì)胞:單核細胞
單核細胞等主要功能是吞噬作用、調節炎症反應、參與(yǔ)抗原提呈、參與鐵的調節。因此當(dāng)機體出現急(jí)性或慢性炎症(zhèng)、組織(zhī)壞死時,都會導致單核細胞增多。中性粒細胞減少時也會(huì)出現單核細胞代償性增加。其他不常見(jiàn)的原因還(hái)包括應激或類固醇、單核細胞白血病等。齧齒類動物中,多達25%的F344大鼠會發生單核細胞(bāo)性(xìng)白血病。發病動物外(wài)周血中,可見非典型性單核細胞,白細胞計(jì)數極度增高和溶血性貧血。
血小板
血小板為骨髓巨核細胞胞(bāo)漿裂解脫落的小塊胞質,其主要(yào)作用是凝血和止血,修補(bǔ)破損血管。齧齒類動物的血小(xiǎo)板數量和凝(níng)血(xuè)過程與其他哺乳(rǔ)動物相似。在(zài)小鼠、大鼠(shǔ)或(huò)豚鼠中,未觀察到血小(xiǎo)板計數的(de)性別或(huò)品係差(chà)異。大鼠的血小板會聚集,計(jì)數往往不(bú)可靠。
血小(xiǎo)板減少
血小板減少症發生時,動物可出現瘀斑、瘀點、黏(nián)膜出血、止血(xuè)困難(nán)等。但血液分析儀判讀為(wéi)血小板減少時,應(yīng)做血塗片確認是否發生凝集,因為血小板做血液采集、運輸、儲存過程中會活化並凝集(jí)進而影響機器讀取數據。通(tōng)過(guò)無創性靜脈穿(chuān)刺(cì)采血(xuè)、使用檸檬酸鹽抗凝劑、減(jiǎn)少采樣後儲存時間(jiān)、避免低溫等措施可以減少這種影響。
通常血小板減少(shǎo)是一過性(xìng)的,跟多種係統性疾病(bìng)都有關聯,隨(suí)著疾病的康複,血小板計數也會恢複正常。持續性的或進行性(xìng)的血小板減少症表明血小板生成或消耗持續失衡。例(lì)如血小板減少伴隨(suí)白細胞減少和(或)貧血通常提示骨髓疾病引起的造血功能障礙;免疫介導的(de)破壞等。
血(xuè)小板增多
血(xuè)小板計數增多可能由原發性血(xuè)小(xiǎo)板(bǎn)增(zēng)多症、骨髓增殖性疾病和繼發性血小板增多症引起。