
小鼠麻醉指導(dǎo)原則
目的
本文是由ARC獸醫人員設計的小(xiǎo)鼠麻(má)醉(zuì)指導原則(zé),旨在(zài)提供一(yī)般建議。這並不意味著它(tā)包含(hán)了適用於小鼠的所有可能藥物組合的詳盡列(liè)表。具(jù)體(tǐ)的麻醉方案應根據(jù)特定情(qíng)況和研究需求與所在機構的獸醫合作(zuò)製定。
麻醉是(shì)使動物完(wán)全或部分失去感覺,伴隨或不伴隨意識喪失。動物可能需要麻醉進行手術、可能引起疼痛的非手術操作,或(huò)需要固定的非疼痛操作(zuò)。在麻醉前、麻醉過程中和麻醉後,必須采取措施確保動物的安全和麻醉的有效性。
麻醉可通過胃腸(cháng)外給藥或吸入(rù)給藥的方式進行。藥物(wù)的選擇取決於具體操作、研究目(mù)的和其他因素,如動物的年齡。對於新(xīn)生小鼠,有些特別考慮下文進行了(le)概述。如(rú)對藥物選擇有疑問,請谘詢所在機構的獸醫。
01、麻醉的一般指導原則和注意事項
適應期:建議所有動物(wù)在運(yùn)輸後適應一周,以防止應激引起的反(fǎn)應。動物至少需要72小時才(cái)能恢複到基本生理狀態。
禁食:由於小鼠無法嘔吐,通常麻醉前無需禁食(shí)。然而,如需禁食(例如為了保持體重),因小鼠的高代謝率,禁食(shí)時間不應超過2-3小時。請注意,切勿限製飲水(shuǐ)。
眼睛保護:在麻醉狀態下,小鼠的眼睛會持續睜開,可能導致角膜幹(gàn)燥和損傷。因此,在(zài)如下條件下,應(yīng)塗抹眼膏(如Puralube® 或 Lacrilube®)來保護眼睛。
麻醉持續時間超過 5 min;
通過麵(miàn)罩進行麻醉。
監護:無論使用何種麻醉劑,均應監測麻醉狀態下的小鼠,以確保心髒和呼吸功能不被過度抑製,以及麻醉(zuì)深度適當。
在沒有專用(yòng)設備的情況下,可以監測以下麻(má)醉小鼠的(de)參數:
麻醉深度:通過掐指(zhǐ)檢查;
呼吸頻率和模式:正常未(wèi)受幹擾的呼吸率約為 180 bpm,麻醉期間可接受 50% 的(de)緩慢下降速率;
粘膜顏色:應為粉紅色而(ér)非藍色(sè)或灰色;
體溫(wēn):可使用直腸溫度計監(jiān)測體溫,體溫應(yīng)保持(chí)在 36℃ 以上(shàng);
血氧飽(bǎo)和度和心(xīn)率:可用專用的齧齒類(lèi)動物脈搏式血氧儀監測血氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);
如對監護或監護設備有任何問題,請與所在機(jī)構(gòu)的獸醫聯(lián)係。
保溫:所有種屬在麻醉狀(zhuàng)態下均存在低體溫的風險。小鼠由於體表麵積與體重比高,尤其容易受到影響。低體溫對動物會產生顯著的(de)生理應激,可能延長恢複時間並有潛在致命風險(xiǎn)。
在所有麻醉過程中提供額外的保溫措施。
補充熱源包括循環水毯、電(diàn)熱墊(diàn)和可在微波或水浴中加熱的市售產品(如等溫墊或凝膠加(jiā)熱器(qì))。
切勿直接將動物放在熱源上。
如對使(shǐ)用(yòng)或購買額外的保溫來源有疑問,請與您所在機構的獸醫聯係。
補液:在麻醉時間較長或動物患病(bìng)、老(lǎo)年或虛弱的情況下,考慮腹腔或皮(pí)下注射溫熱的(de)液體。更多(duō)信(xìn)息請谘詢您(nín)的獸醫。
恢複:持續監測動物直至其(qí)完全恢複。
在幹淨的籠子裏,將(jiāng)動物放在紙巾上(不使用墊(diàn)料)。這樣可以最(zuì)大程度(dù)地減少(shǎo)氣管阻塞或肺炎的(de)風險。
麻(má)醉後的動物單獨放在一(yī)個籠子裏進(jìn)行(háng)恢複。
恢複期間繼續提供額外(wài)的保溫。
當(dāng)動物(wù)能夠走(zǒu)動時(shí),將其(qí)送回原籠中子,並提供飼料和水。
根(gēn)據所進行的手術,為了避免同籠(lóng)夥伴啃(kěn)縫線或切口處的創傷,小鼠可能需要在術後階段單獨(dú)飼(sì)養。任何單獨飼養的計劃都(dōu)應包括在IACUC方案中,以便進行審查和批準。
02、麻(má)醉(zuì)藥物和程序
吸入麻醉劑: 異氟烷是首(shǒu)選的吸入麻醉劑(jì)。 起(qǐ)效快、恢複可靠。
A. 吸入(rù)麻醉可以(yǐ)通過滴瓶法、誘導室、麵罩(zhào)或氣(qì)管插管使用精密蒸汽器進行。
i.滴瓶法:
a.請勿使小鼠直(zhí)接接觸液體吸入麻醉(zuì)劑(可通過在棉花或紗布上放置不可(kě)滲透的網格來實現)。
b. 由於無法控製室內的(de)麻醉劑濃度,並且濃(nóng)度可能迅速達到有毒水平,因此該方法僅適用於非常短的手術,如(rú)尾部活(huó)檢、皮下腫(zhǒng)瘤植入或麵罩麻醉前的誘導。
ii.誘導室、麵罩和氣管插管:
a.這些需要配備氧氣源和精密蒸發器的(de)氣體(tǐ)麻醉機。一些研究單位可能使用室內空氣而不是(shì)純氧作為(wéi)氣源,這(zhè)也是可接(jiē)受的。
b.蒸發器必須與(yǔ)特(tè)定的(de)吸入麻醉劑兼容。
c.由於小鼠呼吸能力較小,使用非循環呼吸係統。
iii. 當使用(yòng)吸入性麻醉時,使用通風櫃或配備氣(qì)體(tǐ)清除係統的麻醉係統,以盡量(liàng)減少職業暴露於排出氣體。
B. 注射麻醉劑:氯胺酮/賽拉(lā)嗪聯合使用是小鼠的首選注射麻醉劑。
下麵列出了其他常用的注(zhù)射劑。
i. 小鼠對各種麻醉藥的敏感性差異顯著。 年(nián)齡(líng)、體(tǐ)質、品係、健康狀況、基因調控和性別等因素都(dōu)可能影響麻醉敏感(gǎn)性。以下劑量僅為一般指(zhǐ)導原則,基於(yú)上(shàng)述(shù)因素可能存在顯著差異。在您的方案中添加麻醉劑時,建議(yì)提供一個範圍,以允許根(gēn)據每隻動物(wù)的特定需求進(jìn)行給藥(yào)。
ii. 不建議在小鼠中進行肌肉注射(IM),因(yīn)為可能導致組(zǔ)織刺激、跛行(háng)和(hé)自殘等並發症。
*一個很好的初始方案是 100 mg/kg 氯胺(àn)酮和 7 mg/kg 塞拉嗪(qín)。
**阿替美唑(5 mg/mL)是右美托咪(mī)定(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。
您需要 4-6 倍於右美托咪定體積的阿替美唑(5 mg/mL)來逆轉右美托咪定。然而,阿替美唑的安(ān)全範圍非(fēi)常高,因此如果逆轉非常緊急,給(gěi)予右美托咪定等體積的阿替美唑,可(kě)使阿替美唑的劑量增(zēng)加 10 倍(bèi),這是(shì)安全的。
同樣,使用與塞拉(lā)嗪(20 mg/mL)等體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉也有效。雖然塞拉嗪具有更高的濃度(20 mg/mL),但阿替美唑(5 mg/mL)更純淨,且與α2 受體結合更緊密,因此等體(tǐ)積逆轉塞拉嗪也可(kě)行。
C. 注射麻(má)醉劑的一種類型是局部麻醉劑。
i. 局麻藥通過特異性結合神(shén)經細胞膜上的電壓門控 Na + 通道來阻斷神經衝動。
ii. 給(gěi)藥途徑包括粘膜(mó)(鼻、眼等)局(jú)部給藥或直接注射到組織和神經束周圍。
iii. 在疼痛刺激(如切口)之前(qián)給予局部(bù)麻醉劑被認為是(shì)輔助鎮痛(tòng)藥物,與阿片類和(hé) 非甾體抗炎藥(NSAID)一起使用。
iv. 由於持續時間較短(數小時),不鼓勵將局部麻醉劑作為主(zhǔ)要鎮(zhèn)痛藥物使用,
03、對小鼠麻醉的特(tè)殊考慮:仔鼠麻醉
目前文獻中描述了幾種適用於新生齧齒動物的麻(má)醉方法,包括注射麻醉(zuì)、吸入麻醉和低溫麻(má)醉。
新生齧齒動物的(de)麻醉會導致親代(dài)啃食後代的問題(tí)。可通(tōng)過確保新生仔鼠完全恢複後再歸還給母鼠來減少這(zhè)種情況。其他措施包(bāo)括讓幼仔接觸來(lái)自於母鼠籠中的汙染墊料,並將幼仔放在窩仔中(zhōng)間位置。
低溫麻(má)醉(zuì)
低溫麻醉隻適用於7日齡以下的新生齧齒動(dòng)物,並且不應(yīng)用於持續時間超過30分鍾的手術。
動物不應直接置於冰上(在動物和底層冰浴之間使用乳(rǔ)膠手套或其他物質)。
當(dāng)足部反射消失時,動(dòng)物已達到適當的麻醉水平。
手術過程中請(qǐng)勿使用(yòng)白熾燈,因為它會使(shǐ)手術區域變熱,導致動物從手術(shù)麻醉(zuì)狀態中蘇醒。
麻醉後,動物應緩慢複溫。快速升溫可能會導致(zhì)組織損傷。可使用循環水(shuǐ)毯、加熱墊 (40℃) 或培養箱 (33℃) 中給動物重新升溫。
幼仔能夠在無直接物理(lǐ)刺激的(de)情況下移動後,可(kě)將其歸還給母鼠。
吸入麻醉
新生齧齒動物可能比成年齧齒動(dòng)物需要更長的吸入(rù)麻醉誘導時(shí)間。
在麻醉盒中進行(háng)誘導通常需 5% 異氟烷,維持(麻醉誘導(dǎo)盒或鼻錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。
注射麻(má)醉
氯胺酮/塞拉嗪是 7 日齡以上小鼠的(de)推薦注射麻醉劑:通過 27g 針頭(tóu) IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺酮和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(最大體積 = 0.5 mL)。
對於7日齡以上的小(xiǎo)鼠,推薦使用(yòng)氯胺酮/塞拉嗪作為(wéi)注射麻(má)醉劑(jì):使用27g針頭腹腔注射50-150 mg/kg氯胺酮和5-10 mg/kg塞拉嗪(最大體積=0.5 ml)。